科澄维生物给您分成 血样裂解 和 组织裂解 两部分，都是做 ELISA 最常用、最稳妥的方法，直接照着做就行。
一、血样（血清/血浆）需要裂解吗？
绝大多数 ELISA（细胞因子、激素、炎症因子等）：
? 血清/血浆不需要裂解
直接离心取上清即可检测。
只有少数特殊指标（如检测胞内蛋白、全血裂解后测）才需要裂解，我下面也一并写上。
全血裂解（如需）
常用于：检测血细胞内蛋白、全血因子
1. 取全血
2. 加 红细胞裂解液（如 ACK 或商用 RIPA 弱裂解）
比例：血:裂解液 ≈ 1:5~1:10
3. 室温/冰上孵育 5–10 min
4. 离心 2500 rpm / 5000×g，5–10 min
5. 取上清，弃沉淀
二、组织样本裂解（ELISA 最常用）
组织必须裂解/匀浆，否则测不到。
给你两套：简单通用版、RIPA 精细版，你按实验室条件选。
方法1：PBS 匀浆法（最简单，适合大多数 ELISA）
适合：分泌型蛋白、细胞因子、生长因子、激素等
1. 组织用预冷 PBS 洗去血污
2. 剪碎，称重
3. 加 预冷 PBS（pH7.4）
比例：1 g 组织 + 9 mL PBS（1:9）
4. 冰上匀浆至无肉眼颗粒
5. 离心 8000–12000×g，4℃，10–15 min
6. 取上清，即为裂解后样本，可直接上 ELISA
可加：
- PMSF（蛋白酶抑制剂）
- 磷酸酶抑制剂（若测磷酸化蛋白）
方法2：RIPA 裂解（蛋白提取更彻底，适合胞内蛋白）
适合：胞内蛋白、总蛋白、信号通路蛋白
1. 组织剪碎
2. 加 RIPA 裂解液（含蛋白酶抑制剂）
比例：1:10 或 1:20（看蛋白丰度）
3. 冰上裂解 30 min，期间振荡几次
4. 离心 10000–15000×g，4℃，10–15 min
5. 取上清，用于 ELISA
三、关键注意（避免做废）
1. 全程冰上操作，防止蛋白降解
2. 不要反复冻融，裂解后分装
3. 裂解液要和试剂盒兼容：- 高浓度去垢剂（如强 RIPA）可能影响抗体结合
- ELISA 尽量用 弱裂解 / PBS 匀浆
4. 若上清浑浊：再离心一次，不要用沉淀
