吲哚乙酸（IAA）ELISA试剂盒基于竞争性酶联免疫吸附测定原理进行检测。
其基本流程如下：
首先，将已知量的标准品或待测样本与一定浓度的IAA酶标记物同时加入预先包被有IAA特异性抗体的微孔板中。在孵育过程中，样本或标准品中的IAA与酶标记的IAA衍生物共同竞争结合固相抗体上的有限结合位点。IAA浓度越高，与抗体结合的酶标记物就越少，反之则越多。
经过一定时间的温育后，进行洗涤步骤，未结合的物质被洗去，仅保留与抗体结合的酶标记物。随后加入底物溶液（如TMB），酶催化底物发生显色反应，生成蓝色产物。反应一定时间后，加入终止液使反应停止，溶液颜色由蓝变黄。最后在酶标仪上于450 nm波长处测定各孔的吸光度（OD值）。
操作过程中需注意以下要点：
1. 试剂准备：所有试剂使用前应平衡至室温（约30分钟），标准品需精确梯度稀释，避免交叉污染。
2. 加样规范：加样应迅速且准确，避免产生气泡；不同样本与试剂使用专用吸头，防止交叉干扰。
3. 温育控制：严格按照说明书规定的时间和温度（通常为37℃或室温）进行孵育，避免阳光直射。
4. 洗涤彻底：建议使用自动洗板机，确保每孔洗涤5次以上，拍干充分，防止残留影响背景值。
5. 显色与终止：显色时间应一致，加入终止液时顺序与加底物一致，确保反应同步终止。
6. 数据读取：应在终止反应后10分钟内完成OD值测定，以保证数据稳定性。
通过规范操作，可确保检测结果的重复性与可靠性。具体操作建议参看产品操作说明。
