人降钙素原（Procalcitonin, PCT）是一种由116个氨基酸组成的蛋白质，在特定生理与病理条件下由甲状腺C细胞及其他组织分泌。酶联免疫吸附测定法（ELISA）是目前体外定量检测PCT的常用技术之一，其检测基于抗原-抗体特异性结合的免疫学原理。
典型的PCT ELISA检测采用双抗体夹心法。
首先，固相载体（通常为微孔板）表面包被有针对PCT分子的特异性捕获抗体。当加入待测样本后，样本中的PCT抗原与固相抗体结合。
随后，加入酶标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。经过充分洗涤去除未结合成分，加入显色底物，酶催化反应产生颜色变化。
最后通过酶标仪测定吸光度值，依据标准品浓度与吸光度之间的剂量-反应曲线，计算样本中PCT的含量。
实验过程中，多个环节直接影响检测结果的可靠性。样本采集后应尽快处理，避免反复冻融，防止蛋白降解。试剂平衡至室温、加样顺序准确、孵育时间与温度控制严格，是确保反应稳定的基础。洗涤步骤需彻底，防止非特异性吸附带来的背景干扰。此外，标准品的梯度稀释应精确操作，以保证标准曲线的线性与可重复性。
整个检测流程需在受控条件下进行，建议设置重复孔以提高数据可信度。操作人员应遵循试剂盒说明书，保持实验条件的一致性，以获得稳定、可比的检测结果。
