为确保检测结果的准确性与可靠性，使用人类粘蛋白（ORM）ELISA检测试剂盒时，请严格遵守以下操作要求：
1.试剂准备：所有试剂在使用前需从2-8℃冷藏环境中取出，平衡至室温（约30分钟），避免冷凝水影响反应体系。标准品为冻干粉，需按说明书精确加入复溶液，充分溶解后静置10分钟，再进行系列稀释。不同批次试剂不可混用，未使用完的微孔条应立即密封并放回原铝箔袋中，于2-8℃干燥保存。
2.样本处理：血清、血浆等样本应避免溶血、脂浊或微生物污染。采集后尽快离心分离，按要求分装并冻存。检测前样本需完全解冻并充分混匀，必要时使用试剂盒提供的稀释液进行适当稀释，确保其浓度在标准曲线范围内。避免样本反复冻融。
3.加样规范：加样时枪头应垂直进入孔内，轻触孔底释放液体，避免产生气泡或溅出。建议每个样本和标准品设置复孔，以提高数据可信度。更换样本或试剂时务必更换新的枪头，防止交叉污染。
4.温育与洗涤：微孔板加样后需在指定温度下避光温育，温育期间避免蒸发，可使用封板膜覆盖。洗涤步骤对结果影响显著，建议使用自动洗板机或手工洗板，每孔注入足量洗涤液，浸泡时间符合要求，确保彻底清除未结合物质，减少非特异性信号。
5.显色与读数：加入底物液后立即避光显色，严格控制反应时间。加入终止液后应尽快在酶标仪450nm波长下完成读数，避免颜色变化影响结果。读数前检查孔内有无气泡，保持板底清洁。
以上内容仅供参考，建议严格按照说明书流程操作，确保实验环境整洁，以获得稳定、可重复的检测数据。
