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人Apelin36(AP36)ELISA检测试剂盒操作注意事项

发表时间:2025-08-25

为确保人Apelin36 ELISA检测结果的准确性与重复性,实验过程中需严格遵守以下操作规范:

 

1.试剂准备:所有试剂在使用前需平衡至室温(约30分钟),避免温度差异影响反应效率。标准品复溶后应充分混匀,按照说明书要求进行梯度稀释,每步稀释均需更换洁净枪头,防止交叉污染。不同批次试剂勿混用,未用完的微孔条应密封干燥保存于2-8℃。

 

2.样本处理:采集的血清、血浆等样本应避免溶血或脂浊,采集后尽快离心分离,按要求分装保存。检测前样本需充分混匀,必要时进行预稀释,确保其浓度在试剂盒检测范围内。反复冻融可能影响抗原活性,应尽量避免。

 

3.加样操作:加样时保持枪头垂直,贴近孔底但不接触孔壁,避免产生气泡。标准品与样本建议设复孔,以提高数据可靠性。每次加样应更换枪头,尤其在标准品与待测样本之间,防止交叉污染。

 

4.温育与洗涤:温育过程应避免阳光直射,确保温育箱温度恒定。洗涤步骤至关重要,建议使用自动洗板机或手工洗板,每孔注入充足洗涤液,充分浸润孔壁,洗板次数和浸泡时间需严格按照说明书执行,确保未结合物质彻底清除。

 

5.显色与终止:加入底物液后,避光显色,时间应精确控制。加入终止液后应尽快读数,防止颜色过度变化。使用酶标仪前应确保孔内无气泡,光学面清洁无指纹或水渍。

 

遵循上述注意事项,可有效减少操作误差,保障检测结果的科学性与可信度。

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