精博生物
产品名称:猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

精博生物特色服务:ELISA免费代测 (本公司提供专业技术服务,生化,PCR,WB,液相等实验外包等检测服务)

广州同城可免费上门取样,外地客户可直接快递寄送样本(特殊样本需按照样本保存方式处理包装)

精博生物产品规格(1):48T 可做42个样本(留6个标曲)

精博生物产品规格(2):96T 可做90个样本(留12个标曲)

实验前准备与步骤

猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

试剂盒检查：
确认试剂盒在有效期内，一般保质期为 6 个月。检查试剂盒内各组分是否齐全，包括微孔板、标准品、检测抗体 - 酶结合物、洗涤缓冲液等，避免因缺少试剂影响实验进程。
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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒
设备与耗材准备：
准备酶标仪（波长需涵盖试剂盒检测波长，如 450nm、630nm ）、恒温培养箱（温度控制精度 ±0.5℃ ）、移液器（量程覆盖 1 - 1000μL ）及配套吸头。实验耗材需保证无菌、无酶残留，否则可能产生非特异性结合，导致假阳性结果。
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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

样本处理：
根据检测要求处理样本（如血清、血浆、细胞培养上清等）。血清样本需在采集后及时分离，4℃条件下离心 10 - 15 分钟（转速 2000 - 3000rpm ），去除细胞成分；血浆样本需使用合适的抗凝剂，如 EDTA、肝素等，防止样本凝固影响检测。加样标准品稀释：按照试剂盒说明书，将标准品进行倍比稀释，一般设置 5 - 7 个浓度梯度 ，如 0ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、80ng/mL 等，用于绘制标准曲线。标准品稀释需准确，误差应控制在 ±5% 以内。样本与对照加样：在微孔板中加入样本、阴性对照和阳性对照，每孔加样量通常为 50 - 100μL 。加样时需避免交叉污染，更换吸头，确保结果可靠。
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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

温育与洗涤温育反应：

加样后，将微孔板放入恒温培养箱中温育，一般在 37℃条件下温育 30 - 60 分钟 。温育使抗原 - 抗体充分结合，温度和时间需严格控制，偏差过大可能影响结合效率，导致检测结果不准确。洗涤操作：温育结束后，弃去孔内液体，每孔加入 200 - 300μL 洗涤缓冲液 ，静置 1 - 2 分钟后甩干，重复洗涤 3 - 5 次 。洗涤可去除未结合的物质，减少背景干扰，若洗涤不充分，背景值会升高，影响结果判读。检测抗体 - 酶结合物添加与反应加酶结合物：每孔加入检测抗体 - 酶结合物 100μL ，轻轻振荡混匀，使酶结合物均匀分布。

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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

二次温育：
再次将微孔板放入 37℃恒温培养箱中温育 30 - 60 分钟 ，让酶结合物与抗原 - 抗体复合物充分结合。洗涤：重复步骤 3 中的洗涤操作，C底去除未结合的酶结合物。显色与终止反应显色：每孔加入显色剂 A、B 各 50μL ，轻轻振荡混匀，在 37℃避光条件下显色 15 - 20 分钟 。显色剂中的底物在酶的催化下发生显色反应，颜色深浅与样本中待测物含量呈正相关。终止反应：加入终止液 50μL ，终止酶促反应，此时溶液颜色由蓝色变为黄色。
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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒
结果分析读数：
在酶标仪上读取各孔在 450nm 波长处的吸光度（OD 值），部分试剂盒需在 630nm 波长处读取作为参比波长，以校正背景。绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘制标准曲线。一般采用四参数 logistic 模型拟合，相关系数 R2 需大于 0.98 ，表明标准曲线拟合良好。计算样本浓度：根据样本的 OD 值，从标准曲线上计算出样本中待测物的浓度。若样本 OD 值超出标准曲线范围，需对样本进行稀释后重新检测。
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猪层连蛋白/板层素(LN)ELISA检测试剂盒

以上就是 ELISA 试剂盒的使用步骤。若你还想了解不同类型 ELISA（如间接法、夹心法）的操作差异、实验常见问题解决方法，欢迎随时和我交流。

温馨提示：试剂盒开封后需一个月内用完,以免影响效果。

精博生物部分ELISA指标：

人二肽基肽酶Ⅳ DPPⅣ ELISA试剂盒	Human dipeptidyl peptldase Ⅳ,DPPⅣ ELISA试剂盒
人组织蛋白去乙酰化酶 HD ELISA试剂盒	Human Histone Deacetylase,HD ELISA试剂盒
人甲基化酶 Methylase ELISA试剂盒	Human Methylase ELISA试剂盒
人抗酒石酸酸性磷酸酶5b TRACP-5b ELISA试剂盒	Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b,TRACP-5b ELISA试剂盒
人磷酸肌醇3激酶 PI3K ELISA试剂盒	Human Phosphotylinosital 3 kinase,PI3K ELISA试剂盒
人蛋白激酶B PKB ELISA试剂盒	Human protein kinase B,PKB ELISA试剂盒
人 HO-2 ELISA试剂盒	Human heme oxygenase 2,HO-2 ELISA试剂盒
人丙酮酸激酶M2型同工酶 M2-PK ELISA试剂盒	Human Pyruvate Kinase,M2-PK ELISA试剂盒
人甲状腺过氧化物酶 TPO ELISA试剂盒	Human Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA试剂盒
人αL岩藻糖苷酶 AFU ELISA试剂盒	Human alpha-L-fucosidase,AFU ELISA试剂盒
人内皮型一氧化氮合成酶 eNOS ELISA试剂盒	Human Endothelial nitric oxide synthase,eNOS ELISA试剂盒